Серологическая диагностика туляремии

Серологическая диагностика туляремии

Полный текст:

  • Аннотация
  • Об авторах
  • Список литературы
  • Cited By

Аннотация

Цель. Сравнительный анализ серологических методов выявления возбудителя туляремии и их оценка. Материалы и методы. Использованы экспериментальные диагностические наборы и тест-системы для постановки серологических методов: реакции непрямой гемагглютинации (РНГА); реакции иммунофлуоресценции (РИФ); иммуноферментного анализа (ИФА) традиционного с использованием микропланшет; ИФА после селективного концентрирования возбудителя туляремии на магноиммуносорбенте (МИС); реакции микрогравиметрического анализа (МГА) на основе пьезобиосенсоров (ПБ) и поверхностного плазмонного резонанса (ППР). Эксперименты проводили с гомологичными штаммами туляремийного микроба (тест-штаммами) и со штаммами гетерологичных микроорганизмов в модельных опытах на водопроводной воде, контаминированной различной концентрацией патогена. Результаты. Определены параметры каждого диагностического метода и дана оценка по показателям: чувствительности (при работе с чистыми культурами (тест-штаммами), загрязненными пробами больших объемов), специфичности, времени постановки и учета результатов, информативности, определения режимов постановки и учета. Заключение. Вышеперечисленные методы диагностики имеют свои достоинства и недостатки, поэтому при выборе того или иного метода исследователь должен руководствоваться своими целями. Так, для скрининговых исследований целесообразно проводить постановку ИФА, РИФ, РНГА; при выявлении возбудителя в больших объемах и загрязненных пробах эффективно применение селективного концентрирования на МИС с последующей постановкой ИФА; для выявления незначительных объемов проб и учета реакции в реальном времени возможно применение МГА и ППР.

Ключевые слова

Об авторах

355035, Ставрополь, ул. Советская, 13-15, р.т. (8652)26-03-12

Список литературы

1. Ермолаева Т.Н., Калмыкова Е.Н., Шашканова О.Ю. Пьезокварцевые биосенсоры для анализа объектов окружающей среды, пищевых продуктов и для клинической диагностики. Российский химический журнал, 2008, 3 (2): 17-29.

2. Долгов В.В. Иммунохимический анализ в лабораторной медицине. Учебное пособие: Изд-во «Триада», 2015: 34-38.

3. Кальной С.М., Жарникова И.В., Дикова С.П., Ляпустина Л.В., Ковалев Д.А., Писаренко С.В., Жарникова Т.В., Куличенко А.Н. Заявка № 2012114858/10, 13.04.2012. Способ получения микрогравиметрического иммуносенсора. Патент РФ № 2510830, 10.04.2014. Бюл. № 10.

4. Тюменцева И.С., Жарникова И.В., Афанасьев Е.Н. и др. Научно-методические разработки биотехнологий производства иммунобиологических препаратов для экспресс-диагностики инфекционных заболеваний и детекции их возбудителей. Биопрепараты. Профилактика. Диагностика. Лечение, 2015, 4: 21-26.

5. Тюменцева И.С., Афанасьев Е.Н., Старцева О.Л., Курчева С.А., Жарникова И.В., Гаркуша Ю.Ю., Жданова Е.В., Кальной С.М. Разработка стандартных условий биотехнологии производства иммуномагнитного сорбента для экспресс-диагностики опасных инфекционных заболеваний. Технологии живых систем. 2017, 2: 52-58.

6. Тюменцева И.С., Курчева С.А., Афанасьев Е.Н., Жарникова И.В., Жданова Е.В., Старцева О.Е., Гаркуша Ю.Ю., Семирчева А.А. Особенности пробоподготовки с использованием иммуномагнитного сорбента при исследовании полевого материала на наличие возбудителя чумы. Военно-медицинский журнал. 2018, 339 (5): 42-46.

7. Хаиров С.Г., Юсупов О.Ю., Яникова Э.А. Заявка № 2012101543/10, 17.01.2012. Способ получения эритроцитарного антительного овисного диагностикума для реакции непрямой гемагглютинации (РНГА) с целью индикации овисного антигена в биоматериале. Патент РФ № 2509306, 10.03.2014. Бюл. № 7.

8. Gall D., Nielsen K., Forbes L. et al. Alidation of the fluorescence polarization assay and comparison to other serological assays for the detection of serum antibodies to Brucella abortus in bison. J. Wildl. Dis. 2000, 36 (3): 76-469.

9. Pohanka M., Skladal B. Piezoelectric Immunosensor for the Direct and Rapid Detection of Francisella tularensis. Foilia Microbiol. 2007, 52 (4): 325-330.

Читайте также:  Нимесил по рецепту или нет 2017

10. Sting R., Ortmann G. Erfahrungen mit einfachen ELISA-Testsystemes fur die Brucellose — Serologie bei Rind, Schaf und Ziege. Berlin. Und munch. Wochenschr 2000, 113 (1): 22-28.

Для цитирования:

Жарникова И.В., Ефременко В.И., Жарникова Т.В., Курчева С.А., Кальной С.М., Ефременко Д.В., Исакова А.А., Инденбом А.В. Серологические методы выявления возбудителя туляремии и их оценка. Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 2019;(4):32-38. https://doi.org/10.36233/0372-9311-2019-4-32-38

For citation:

Zharnikova I.V., Efremenko V.I., Zharnikova T.V., Kurcheva S.A., Kalnoy S.M., Еfremenko D.V., Isakova A.A., Indenbom A.V. Serological methods for detection of the causative agent of tularemia and their evaluation. Journal of microbiology, epidemiology and immunobiology. 2019;(4):32-38. (In Russ.) https://doi.org/10.36233/0372-9311-2019-4-32-38


Контент доступен под лицензией Creative Commons Attribution 4.0 License.

Francisella tularensis IgM

Иммуноферментный тест-набор SERION ELISA classic Francisella tularensis IgG и IgM это качественные и количественные тесты для выявления антител человека к липополисахарину(LPS) туляремии в сыворотке или плазме. Тесты предназначены для диагностики туляремии, контроля успешности прививки, для определения статуса перед прививкой для избежания нанесения ущерба прививкой, а также для поддержания эпидемиологических разработок.

Туляремия– это передающийся человеку зооноз, вызванный бактерией Francisella tularensis, который проявляется в различных клинических картинах болезни. Поскольку картина жалоб у животных похожа на чуму и болезнь часто поражает зайцев и диких кроликов, её также называют заячьей чумой. Также в народе курсируют названия чума грызунов, лемминговая лихорадка или болезнь Паринода. Возбудителем Francisella tularensis(прежнее название также Pasteurella tularensis) является грамотрицательная плеоморфная бактерия. Три клинически существенные формы из всего четырёх подвидов серологически практически не различаются. Эпидемиологически, биохимически и генотипно можно различить два типа:
Francisella tularensis biovar tularensis(типA) высоковирулентен. Если не подвергать инфекцию лечению, она дает высокую смертность. Francisella tularensis biovar holarctica (типB) намного менее вирулентен, однако может давать также тяжелую клиническую картину. Естественным резервуаром возбудителя Francisella tularensis являются различные мелкие млекопитающие, как напр. зайцы, кролики, мыши, крысы или белки.
Возбудитель был также уже обнаружен и в пробах грунта и водоёмах и может там, в зависимости от климатических условий, долгое время сохраняться. Заражение человека может происходить через прямой контакт через кожу или слизистую инфицированных животных или их испражнения. Также передаточным звеном могут быть эктопаразиты. Ещё одним потенциальным путем заражения может быть употребление в пищу зараженного и не достаточно хорошо проваренного мяса и ингаляция инфицированной пыли. Передача заболевания от человека человеку маловероятна и пока такие случаи не известны.

Туляремия встречается во всем северном полушарии между30-м и 71-м северным градусом широты, особенно в скандинавских странах, России, Японии, Китае, США и Канаде. Заражаются чаще сельские жители. В Германии туляремия считается редким инфекционным заболеванием. Первые симптомы туляремии проявляются в основном на2-й– 5-й день после инфицирования. Инкубационный период в зависимости от дозы заражения, пути заражения и от вирулентности подвида возбудителя может колебаться от1 до21 дней. Наряду с классическими симптомами, такими как лихорадка, вялость, а также
мускульные боли и боли в конечностях клиническая картина туляремии может быть очень разнообразна. Клинически различают следующие формы:

Читайте также:  Хроническое воспаление прямой кишки

• Язвенно-желёзная: кожные язвы с региональными увеличениями лимфатических узлов(LKS)
• Желёзная: региональные увеличения лимфатических узлов без кожных язв
• Глазно-желёзная: конъюктивит с увеличением лимфатических узлов в районе уха
• Рото-глоточная: стоматит, фарингит(воспаление глотки), тонзилит (воспаление миндалин), увеличение шейных лимфоузлов
• Кишечная: боли в животе, понос и рвота
• Лёгочная: первичное заболевание лёгких и плевры
• Тифоидная: первичное лихорадочное заболевание с сепсисом

Ингаляция возбудителя часто ведет к лёгочным проявлениям(напр. воспаление лёгких) или к септической, сходной с тифом картине заболевания. Инфицирование через пищеварительный тракт может привести к рвоте, болям в животе и поносу. Выявление культуры из периферической крови, мазков и биопсийного материала сложно и может длиться несколько недель. Поскольку речь идет об острозаразном
возбудителе, такую диагностику проводят только специализированные лаборатории. По этой причине идентификация происходит чаще всего непрямым способом через иммунологические и молекулярные методы. Серологическое подтверждение через увеличение специфических антител может быть проведено
при помощи теста ELISA.

Вовремя распознанное заболевание туляремии можно успешно лечить антибиотиками. Непролеченная инфекция возбудителем типа А ведет к отказу многих систем органов и поражению центральной нервной системы и в40% случаев к смерти; в случае применения лечения смертность составляет примерно1%.
Инфицирование возбудителем типа В протекает при всех путях заражения более мягко и с низким смертельным исходом. Из-за высокой заразности возбудителя а также многочисленных возможностей его
распространения, многие страны проводили опыты по использованию возбудителя
в качестве биологического оружия.

Тесты SERION ELISA classicFrancisella tularensis IgG или IgM позволяют количественное определение человеческихIgG- илиIgM-антител в сыворотке или плазме к липополисахарину(LPS) туляремии Francisella tularensis ssp. holarctica (вид LVS).

Туляремия – природноочаговая зоонозная инфекция, широко распространенная на территории России в пределах умеренного климатического пояса Северного полушария. Природные очаги туляремии распространены в различных климатических зонах и приурочены к разнообразным ландшафтам.

Возбудитель туляремии – мелкая коккобактерия, является одним из наиболее инфекциозных микроорганизмов и обладает высокой патогенностью для человека.

Возбудитель туляремии характеризуется высокой устойчивостью в окружающей среде, особенно при низких температурах и высокой влажности (выживает при -30С, сохраняется во льду до 10 месяцев, в мороженом мясе – до 3-х месяцев), менее чувствителен к высыханию – в шкурках павших от туляремии грызунов сохраняется до 1,5 месяцев при комнатной температуре и до 1 недели при температуре 30С. Возбудитель остается жизнеспособным в речной воде – до 9 месяцев, в почве – до 2,5-4х месяцев; на зерне и соломе – от 3-х недель до 6 месяцев в зависимости от температуры окружающей среды. Длительно сохраняется в молоке, сливках при низких температурах. Малоустойчив к высоким температурам, солнечному свету, УФО – лучам, дезинфицирующим средствам.

Резервуаром и источником инфекции при туляремии являются различные виды диких и синантропных грызунов (ондатры, зайцы, водяные крысы, полевки, хомяки, мыши и др.), а также домашние животные – свиньи, овцы, крупный рогатый скот. Среди животных болезнь распространяется в основном через кровососущих насекомых. От человека к человеку туляремия не передается.

Для туляремии характерно множественность механизмов заражения и путей передачи возбудителя инфекции: трансмиссивный механизм заражения человека осуществляется в результате укусов инфицированными кровососущими членистоногими (комары, слепни, клещи, оводы); контактный – через поврежденные и неповрежденные кожные и слизистые покровы при соприкосновении с больными или павшими грызунами и зайцами; алиментарный – при употреблении продуктов питания, сельскохозяйственных продуктов и воды (колодезной, горных ручьев и других открытых водоемов), контаминированных возбудителями туляремии от больных грызунов; аспирационный – при вдыхании воздушно-пылевого аэрозоля, образующегося при переработке зерна, перекладке сена, соломы, контаминированных возбудителем туляремии от больных грызунов.

Читайте также:  Можно ли есть творог каждый день взрослому

Восприимчивость к туляремии очень высокая. Болезнь чаще регистрируется в виде спорадических случаев, сезонный подъем заболеваемости отмечается в летнее-осенний период года. После перенесенного заболевания формируется стойкий иммунитет.

Возбудитель туляремии может проникать в организм различными путями, что обуславливает многообразие клинических проявлений. Инкубационный период составляет от нескольких часов до 20 дней (в среднем – 3-7 дней). По локализации первичных поражений различают следующие клинические формы туляремии: язвенно-бубонную, бубонную, глазно-бубонную, легочную, абдоминальную, генерализованную, другие формы туляремии – ангинозно-бубонная.

Заболевание начинается остро с внезапного подъема температуры до 38,5-40С. Появляется резкая головная боль, головокружение, боль в мышцах ног, спины и поясничной области, потеря аппетита, расстройства сна. На месте внедрения инфекции часто оказываются первичный аффект — инфильтрат, язвы, нагноения. Лихорадка является длительной, характерный признак — увеличение лимфатических узлов, размеры которых могут быть от горошины до грецкого ореха. Часто появляется сыпь полиморфного характера в первые 2-3 недели болезни и, как правило, на симметричных участках тела – в виде перчаток, носков, воротника, маски. В случае развития генерализованной формы заболевания чаще возникают туляремийные пневмонии вторичного типа, нередко образуется шок инфекционно-токсического характера. Возможно возникновение менингитов, миокардитов, менингоэнцефалитов, полиартритов и др.

При появлении симптомов заболевания необходимо обратиться к врачу. Лечение больного проводится в условиях стационара, основным методом лечения больных туляремией является антибиотикотерапия. Прогноз благоприятный. Летальный исход возможен в 0,5% случаев при генерализованной и легочной формах.

Для лабораторной диагностики туляремии используются: серологический, бактериологический, биологический, молекулярно-генетический методы исследования; специфическая и быстрая диагностика производится с применением кожно-аллергической пробы, которая становится положительной уже к 3-5 дню заболевания.

В целях профилактики заболевания туляремией необходимо соблюдать правила личной гигиены – тщательно мыть руки перед приемом пищи, хранить продукты питания и воду в недоступных для грызунов местах. Не рекомендуется пить воду из неизвестных источников, при проведении сельскохозяйственных работ и работ на загородных дачных участках необходимо использовать средства индивидуальной защиты – маски, перчатки, защитную рабочую одежду и др. Необходимо применять средства защиты от укусов клещей и других насекомых – репелленты и защитную одежду. Трупы грызунов нужно сжигать, нельзя прикасаться к ним незащищенными руками.

Самым эффективным методом профилактики туляремии является иммунизация (вакцинация). Вакцинацию проводят населению, проживающему на неблагополучных по туляремии территориях, а также контингентам «риска» (полевые и лесные работы, обработка меха, лабораторная работа с животными, сотрудники дезстанций). Иммунизация против туляремии проводится в соответствии с национальным календарем профилактических прививок.

Ежегодное проведение дератизационных мероприятий – надежное средство профилактики туляремии.

Если вы нашли ошибку: выделите текст и нажмите Ctrl+Enter

Ссылка на основную публикацию
Сердечная астма код по мкб 10
Астма — периодическое сужение дыхательных путей, вызывающее одышку и свистящее дыхание. Может развиваться в любом возрасте, но до половины всех...
Секс без презерватива вероятность забеременеть
Разбираем популярные заблуждения о контрацептивах вместе с кандидатом медицинских наук Наш эксперт — кандидат медицинских наук Диана Исламиди Фото: Артём...
Секс игрушки для уретры
Страшный сомик кадиру Самая свирепая рыба Амазонки - это маленький сомик кандиру (Vaudellia cirrhosa). Это единственная рыбка, которая паразитирует в...
Сердечная атака
Паническая атака (ПА) представляет собой необъяснимый, мучительный для больного приступ плохого самочувствия, сопровождаемый страхом или тревогой в сочетании с различными...
Adblock detector